Las proteínas de unión a penicilina (PBPs), son un grupo de enzimas periplásmicas responsables de la polimerización, ensamblaje y modificación del peptidoglicano bacteriano. De acuerdo a su estructura molecular, las PBPs se clasificaron en HMM-PBP (alta masa molecular) y LMM-PBP (baja masa molecular). Todas ellas comparten un dominio de unión a penicilina. Las HMM-PBPs a su vez se clasifican en clase A y clase B (por ejemplo Eco-PBP1, Eco-PBP2). Estas son responsables de la inserción de los precursores de peptidoglicano en las cadenas pre-existentes a través de las reacciones de Transglicosilación y Transpeptidación. Las LMM-PBPs se agruparon como PBP de clase C y se han subdividido en 4 subgrupos referidos a E coli; tipo-4 (Eco-PBP4): DD-endopeptidasas y DD-carboxipeptidasas, tipo 5 (Eco-PBP5): las DD-carboxipeptidasas mayoritarias, tipo 7 (Eco-PBP7): DD-endopeptidasas, y tipo AmpH (Eco-AmpH), como un enzima bifuncional DD-carboxipeptidasa y DD-endopeptidasa con una estructura cercana a la clase C de β-lactamasas. PBP5 es la LMM-PBP mas abundante de E. coli, y tiene un papel importante en el control del diámetro de las células y la formación del septo. Estudios recientes sugieren que las LMM-PBPs, en particular PBP5, desempeñan un papel en la resistencia intrínseca a β-lactámicos. Por otra parte, la recién cristalizada PBP5 de P. aeruginosa muestra cierta actividad β-lactamasa, añadiendo aún más interés al papel de las LMM-PBP en la resistencia a los antibióticos. A la luz de todos estos resultados, el objetivo del presente trabajo fue investigar sistemáticamente los roles potenciales de las LMM-PBPs [DacB (PBP4), DacC (PBP5) y PbpG (PBP7)] de P. aeruginosa en la estructura del peptidoglicano, la resistencia a β-lactámicos y la regulación de AmpC. Para este propósito, se generaron y analizaron todas las posibles combinaciones de mutantes simples y múltiples de LMM-PBPs y AmpC. Los datos muestran un papel relevante de DacC en la expresión de AmpC, la estructura del peptidoglicano y la resistencia. La proteína se identificó como la principal DD-carboxipeptidasa en Pseudomonas.